Optimisation d'un modèle in vitro de testing pharmacologique prenant en compte le micro-environnement endothélial - études à partir de cellules de cancer bronchique non à petites cellules
| Titre | Optimisation d'un modèle in vitro de testing pharmacologique prenant en compte le micro-environnement endothélial - études à partir de cellules de cancer bronchique non à petites cellules |
| Type | Thèse d'exercice : Pharmacie |
| Auteurs | Bourreau Clara |
| Directeurs | Clère Nicolas |
| Année | 2021 |
| URL | https://dune.univ-angers.fr/fichiers/14000012/2021PPHA14545/fichier/14545F.pdf |
| Mots-clés | CBNPC, chimiosensibilité, EndoMT, ITK, MET, médecine personnalisée |
| Résumé | A. Introduction, objectifs Le cancer broncho-pulmonaire non à petites cellules (CBNPC) fait partie des cancers les plus fréquemment retrouvés dans la population mondiale. L’hétérogénéité mutationnelle du CBNPC, a permis le développement de nouvelles thérapies ciblées en association ou complément des chimiothérapies conventionnelles. Cette hétérogénéité est également retrouvée au sein du micro- environnement tumoral (MET) de plus en plus étudié. Ainsi, le MET participe à la croissance et la dissémination tumorales notamment par les processus d’angiogenèse ou de transition endothélio-mésenchymateuse (EndoMT). Ces derniers peuvent être impliqués dans les phénomènes de résistances. Notre projet se propose d’évluer la réponse aux tratiements des celluesl tumorales en prenant en compte leur MET B. Sujets et Méthodes Deux lignées cellulaires tumorales de CBNPC (A549 ; H1755) et des cellules endothéliales (HUVECs) ont été sélectionnés pour l’étude. Des inhibiteurs de tyrosine kinase (16 ITK totaux) et chimiothérapies conventionnelles (6 totales) indiqués ou non dans le cancer broncho- pulmonaire ont été choisies. Ces molécules ont été utilisées à des concentrations voisines de leurs aires sous la courbe, En vue d’évaluer l’impact du compartiment endothélial sur la réponse aux différents traitements, la transition endothélio mésenchymateuse, induite par les milieux conditionnés des cellules tumorales en culture, a été étudiée au travers des expériences de Western blot, cytométrie en flux, et RT-qPCR. C. Résultats Les concentrations inhibitrices 50 (CI50) et les pourcentages de viabilité cellulaire de chacune des molécules ont permis d’identifier 6 IT et 4 chimiothérapies conventionnelles capables d’inhiber significativement la prolifération des cellules tumorales des lignées tumorales. De plus, nous avons montré qu’en présence de milieu conditionné isolé des cellules A549 et H1755, une transition endothélio-mésenchymateuse pouvait se mettre en place. D. Conclusion Ce projet permet la mise en place de modèles expérimentaux permettant (i) d’apprécier les réponses aux thérapeutiques anti- tumorales et (ii) d’évaluer l’impact des milieux conditionnés sur la mise en place de l’EndoMT. L’ensemble de ces données permettra à termes de proposer des modèles de médecine personnalisée associant une analyse pharmacologique et génomique qui contribuera à améliorer la prise en charge des patients atteints de CBNPC. |
| Résumé en anglais | A. Introduction, aim Non-small cell lung cancer (NSCLC) is one of the most common cancers founds in the world population. The mutational heterogeneity of NSCLC has enabled the development of new targeted therapies in combination or complement to conventional chemotherapies. This heterogeneity is also found within the tumor microenvironment (TME) which has been increasingly studied. Thus, TME participates in tumor growth and dissemination, through the process of angiogenesis or endothélio-mesenchymal transition (EndMT) which may be involved in resistance phenomena. The latter can be involved in the phenomena of resistance. Our project proposes to evaluate the reponse to treatments of tumor cells by taking into account their TME. B. Material and methods Two tumor cell lines of NSCLC (A549; H1755) and endothelial cells (HUVECs) were selected for the study. Tyrosin kinase inhibitors (16 total TKIs) and conventional chemotherapies (6 total) indicated or not in bronchopulmonary cancer were chosen. These molecules were used at concentrations close to their areas under the curve.To assess the impact of the endothelial compartment on the response to different treatments, the study of the endothélio-mesenchymal transition, induced by conditioned media of tumor cells in culture, was studied by Western blot experiments, flow cytometry, ad RT-qPCR on endothelial cells of the HUVECs type. C. Results The 50% inhibitory concentration (IC50) and the percentages of cell viability of each of the molecules made it possible to identify 6 TKI and 4 cytotoxic molecules capable of significantly inhibiting the proliferation of tumor cells from A549 and H1755 cell lines studied. In addition, we were able to show that in the presence of conditioned medium isolated from A549 and H1755 cells, an endothélio-mesenchymal transition could take place. D. Conclusion This project allows the establishment of experimental models allowing (i) to assess the responses to anti-tumor therapies and (ii) assess the impact pd conditioned media on the implementation of EndMT. These data will ultimately allow models of personalized medicine to be offered combining pharmacological and genomic analysis that will help improve the management of patients with NSCLC. |
| Langue de rédaction | Français |
| Nb pages | 98 |
| Diplôme | diplôme d'État de docteur en pharmacie |
| Date de soutenance | 2021-12-01 |
| Editeur | Université Angers |
| Place Published | Angers |
| Libellé UFR | UFR de Sciences Pharmaceutiques et d'Ingénierie de la Santé |
| Numéro national | 2021ANGE079P |