Les lichens résultent de la symbiose entre un champignon (mycobionte) et une algue verte et/ou une cyanobactérie (photobionte). Nephroma laevigatum, le lichen étudié lors de ce travail, appartient à cette dernière catégorie. Ce lichen correspond à l’association d’un champignon appelé également Nephroma laevigatum avec une cyanobactérie (genre nostoc). Les lichens produisent de nombreux métabolites secondaires, ayant des applications variées : cosmétique, médecine, parfumerie … Un screening réalisé sur plusieurs lichens présents dans le Limousin a démontré l’activité antiproliférative et anti-biofilms fongiques (C. albicans) de l’extrait de Nephroma laevigatum. L’étude des métabolites secondaires présents chez ce lichen et ses champignons endolichéniques a été confiée à Aurélie Lagarde dans le cadre de sa thèse. Lors de ce stage, 2 fractions issues de l’extraction au dichlorométhane de N. laevigatum ont été étudiées. Pour cela, une séparation selon la polarité (colonne de silice) ou selon la taille (colonne de Sephadex®) des composés a été effectuée. Pour certaines des fractions obtenues, une purification par CCM préparative a été réalisée. Les fractions intéressantes obtenues ont ensuite été analysées par RMN (Résonance Magnétique Nucléaire), spectrométrie de masse, ou CLHP (Chromatographie Liquide Haute Pression) afin d’obtenir des informations sur la structure des molécules présentes et de les identifier. Ainsi, la 1-O-méthylfragiline a été identifiée dans une des fractions purifiées, de même que la 7-chloroémodine, et l’émodin.
Lichens are the result of a symbiotic association between a fungus (mycobiont) and an alga and/or a cyanobacterium (photobiont). Nephroma laevigatum, the lichen studied in this work, belongs to this last category. This lichen is an association between a fungus, also named Nephroma laevigatum, with a cyanobacterium. (genus Nostoc). Lichens produce a lot of secondary metabolites, that have various applications : cosmetic, medicine, perfumery, … A screening carried out with several lichens found in Limousin region showed the antiproliferative and fungal anti-biofilm (C. albicans) activities of the N. laevigatum extract. The study of secondary metabolites from N. laevigatum and its endolichenic fungi is part of Aurélie Lagarde’s thesis. During this training, 2 fractions from the extraction with dichloromethane of N. laevigatum have been analyzed. For this purpose, a separation depending on the polarity (silica column) or on the size (Sephadex® column) of the compounds was realized. For some of the obtained fractions, a purification by preparative TLC (Thin Layer Chromatography) was performed. Potential interesting fractions obtained after the purification were then analyzed by NMR (Nuclear Magnetic Resonance), mass spectroscopy, or HPLC (High Pressure Liquid Chromatography) in order to obtain information on the molecules’ structure and to identify them. Thus, the 1-O-methylgragilin molecule was identified in one of the purified fractions, as well as 7-chloroemodin and emodin.