Mise au point d'une méthode de dosage quantitative de la carnitine et des acylcarnitines plasmatiques en HPLC couplée à la spectrométrie de masse en tandem dans le diagnostic des anomalies de la bêta oxydation des acides gras
| Titre | Mise au point d'une méthode de dosage quantitative de la carnitine et des acylcarnitines plasmatiques en HPLC couplée à la spectrométrie de masse en tandem dans le diagnostic des anomalies de la bêta oxydation des acides gras |
| Type | Thèse d'exercice : Médecine |
| Auteurs | Benatre Harmony |
| Directeurs | Simard Gilles |
| Année | 2015 |
| URL | http://dune.univ-angers.fr/fichiers/20031805/2015MCEM3319/fichier/3319F.pdf |
| Mots-clés | beta oxydaion des acides gras, Carnitine / Acylcarnitines, maladies héréditaires du métabolisme, quantification, spectrométrie |
| Résumé | Les Maladies Héréditaires du Métabolisme et notamment les anomalies de la bêta oxydation des acides gras sont des maladies rares mais très diverses qui peuvent se manifester plus ou moins tôt dans la vie des personnes atteintes. Ces maladies sont dues à des mutations codant pour des protéines impliquées dans ces voies métaboliques. Alors que leur prévalence individuelle est faible, on estime leur prévalence collective entre 1/5000 et 1/10000 naissances. L’outil diagnostic principal de ces anomalies est l’analyse de la carnitine et des acylcarnitines dans les liquides biologiques. Actuellement, ce sont des analyses semi-quantitatives qui prédominent, en FIA-MS/MS, sur matrice de sang total. Elles font partie des programmes de dépistage néonatal dans de nombreux pays. Nous avons voulu proposer, au-delà du cadre du dépistage néonatal, une analyse quantitative de la carnitine et des acylcarnitines plasmatiques. Nous avons donc développé une méthode chromatographique couplée à la spectrométrie de masse en tandem. Nous avons procédé à la validation de cette méthode et nous avons effectué une estimation intra-laboratoire des valeurs de référence biologiques pour différentes tranches d’âge. Des améliorations restent à apporter à cette méthode mais nous espérons qu’elle aura un impact clinique positif sur le diagnostic de ces pathologies. |
| Résumé en anglais | The Hereditary Diseases of the Metabolism (HDM) and in particular the anomalies of beta oxidation of the fatty-acids are very diverse uncommon diseases. Nonetheless, one can suffer from these diseases more or less early in his life. These diseases are due to genetic mutations in proteins implied in these metabolic pathways. Whereas the individual prevalence is low, their collective prevalence reaches 1/5000 to 1/10000 births. The principal tool to diagnose these anomalies is the analysis of carnitine and acylcarnitines in biological fluids. Usually, semi-quantitative analyses prevail, in FIA-MS/MS on total blood matrix. They belong to the neonatal routine detection of HDM in many countries. We wanted to propose, beyond the framework of the neonatal routine detection, a quantitative analysis of the plasmatic carnitine and acylcarnitines. Thus, we developed a chromatographic method coupled with the tandem mass spectrometry. We carried out the validation of this method and we did an intra-laboratory estimation of the biological values of reference for various age brackets. Improvements remain to be brought to this method but we hope that it will have a positive clinical impact on the diagnosis of these pathologies. |
| Langue de rédaction | Français |
| Nb pages | 175 |
| Diplôme | Diplôme d'État de docteur en médecine |
| Date de soutenance | 2014-11-24 |
| Editeur | Université Angers |
| Place Published | Angers |
| Libellé UFR | UFR Médecine |
| Numéro national | 2015ANGE006M |