Afin de vérifier les correspondances entre ses collections in vitro et in vivo de Scilles du Pérou, l’entreprise Ernest Turc doit produire suffisamment de matériel végétal pour pouvoir réaliser des essais et valoriser, par la suite, la génétique de cette collection originale. Le protocole proposé dans ce rapport retrace les étapes de culture, allant de la désinfection des explants sources jusqu’à l’enracinement des plants. Des fragments foliaires de plantes de parterres décoratifs ou ayant poussé en serre sur un sol recouvert d’une bâche ont été prélevées et désinfectées pour déterminer la meilleure source de matériel végétal et le meilleur protocole de désinfection pour l’introduction des explants. Également, des observations au microscope ont été réalisées sur plusieurs tubes contaminés pour identifier les micro-organismes présents. Les plantes issues de serre ont eu significativement moins de contaminants avec 45 à 49% de contamination contre 98 à 100% de contamination pour des explants issus de plantes de parterre décoratif. Le test de désinfection avec de l’hypochlorite de calcium ou de l’hypochlorite de sodium n’a pas mis en évidence de différence significative. Le milieu d’introduction S2I (MS full strength + 0.1 mg/L BA + 0.5 mg/L ANA + 0.01 mg/L TDZ) est le seul qui ait permis la formation de cal. Les explants formant des cals seront transférés sur différents milieux de multiplication composés de BA, KIN, et/ou ANA (SCM, S1M ou S2M) pour plusieurs cycles de culture, puis enracinés sur le milieu S1E comportant 1 mg/L d’AIB.
In order to verify the correspondences between its in vitro and in vivo collections of Peruvian Scilla, the Ernest Turc company needs to produce sufficient plant material to carry out trials and subsequently exploit the genetics of this original collection. The protocol proposed in this report covers the cultivation stages, from disinfection of the source explants to rooting of the plants. Leaf fragments from plants from decorative beds or grown in greenhouse on soil covered with a plastic-mulch were taken and disinfected to determine the best source of plant material and the best disinfection protocol for introducing explants. Microscopic observations were also made on several contaminated tubes to identify the micro-organisms present. Greenhouse plants were significantly less contaminated, with 45-49% contamination compared with 98-100% for explants from ornamental bedding plants. The disinfection test with calcium hypochlorite or sodium hypochlorite showed no significant difference. The introduction medium S2I (MS full strength + 0.1 mg/L BA + 0.5 mg/L ANA + 0.01 mg/L TDZ) was the only one that allowed callus formation. The callus-forming explants will be transferred to different propagation media composed of BA, KIN and/or NAA (SCM, S1M or S2M) for several culture cycles, then rooted on S1E medium containing 1 mg/L IBA.