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Les effets cocktails du chlordécone avec deux pesticides présents aux Antilles françaises sur Paracentrotus lividus

Résumé en français
L’utilisation de produits phytosanitaires est soumise à une forte réglementation avec des tests d’écotoxicités réalisés sur chaque substance. Malgré cela, ils ont été et sont toujours utilisés massivement. Ces pesticides ne se retrouvent pas seuls dans les eaux, les sols et les organismes, beaucoup d’études se sont focalisées sur un effet du produit seul. L’objectif ici est de caractériser les effets cocktails d’un mélange de pesticides (CLD, AMPA et AZ) en concentrations environnementales présentes dans les Antilles françaises. Au cours de mon stage, nous avons mis en place un protocole visant à réaliser cette expérimentation menée sur des oursins P. lividus. En parallèle, l’évaluation de l’impact des cultures conventionnelles sur des abeilles A. mellifera vise à mieux comprendre les modifications de l’expression de certains gènes. Nos travaux ont montré la complexité de la mise en place d’un protocole non testé sur des animaux vivants tels que des oursins. Le point central de cette expérimentation est l’extraction de l’ARN. Nous avons choisi les gonades qui sont des tissus avec une quantité de matière biologique suffisante. Cependant, les méthodes d'extraction de l'ARN au « TRIzol » a donné des résultats qui n'étaient pas de qualité suffisante pour réaliser le séquençage ARN-Seq. D'autres protocoles doivent être testés. L’élevage fût sujet à discussion, les parois de verre, pour la première fois au contact d’eau de mer, ont absorbé le sel de manière non-négligeable. Un temps de saturation est donc nécessaire. Le matériel utilisé défaillant a entraîné un taux de mortalité de 29,6% chez les oursins nous empêchant de les mettre en présence des trois pesticides. La limite de temps n’a permis d’inclure que l’expression des gènes des échantillons témoins d’abeille, ces derniers sont encourageants en vue de l’analyse comparative.
Résumé en anglais

The use of phytosanitary products is subject to strict regulations, with ecotoxicity tests carried out on individual substances, despite the fact they have been used concurrently on a massive scale. Numerous pesticides coexist in water, soil, and organisms alike, but studies have focused solely on the effect of one single product. One aim of the LiCOCO project is to characterize the cocktail effects of pesticides (CLD, AMPA, & AZ) at environmental concentrations present in the FWI. During my internship we set up a protocol to carry out this experiment on P. lividus sea urchins. Simultaneously, we assessed the impact of conventional crops on A. mellifera bees to obtain a better understating of possible changes in gene expression. Our work has shown the complexity of implementing an untested protocol on live animals. The central point of this experiment is RNA extraction. P. lividus gonads were used for RNA extraction due to their sufficient biomass. The TRIzol RNA extraction methods yielded results that were unviable for RNA-Seq quality. Other protocols need to be tested. Husbandry was subject to discussion due to the aquariums absorbing salt from the InstantOcean seawater, necessitating a seawater saturation period. Defective equipment resulted in a 29.6% sea urchin mortality rate, preventing the scheduled cocktail pesticides exposure. Due to time constraints, only the gene expression data from the control bee samples were included, providing promising results for the comparative analysis.

Année
2023
Année de soutenance
2024
Nombre de pages
24
Type de dépôt
Rapport de stage
Langue de publication
Français
Éditeur
Université Angers
Lieu d'édition
Angers
Citation Key
dune17908
URL
http://dune.univ-angers.fr/fichiers/23008747/2023TMTE17908/fichier/17908F.pdf
Libellé de l'étape
M1 THE / Toxicologie Humaine et Environnementale
Bac+
4
Maître de stage
Paul Calli
Libellé de l'UFR
Faculté des Sciences
Libellé du diplôme
Master Toxicologie environnementale & humaine
Entreprise
IMBE - "Institut Méditerranéen de Biodiversité et d’Ecologie marine et continentale"
Tuteur
Pierre-Henri Villard
Fichier